pda培养基如何配置_PDA培养基的配制方法 环球观点

1、PDA培【péi】养基的【de】配【pèi】方【fāng】土豆【dòu】 200g葡萄糖【táng】 20g琼脂 15～20g水 1000mLpH值【zhí】 自然PDA培养基的配制称量和熬煮 按培养基【jī】配方逐一称取去皮土豆。

2、土豆切【qiē】成小【xiǎo】块【kuài】放入锅【guō】中，加【jiā】水1000ml，在加热器上加热【rè】至沸腾，维持【chí】20-30min，用可用2层【céng】纱布趁热在量杯上【shàng】过滤，滤渣弃取。

3、滤液补充水分到1000ml。

(资料图)

4、加热溶解 把滤【lǜ】液放入锅中，加【jiā】入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎【suì】)，然后放在石【shí】棉网上，小火加热，并用玻【bō】棒不断搅【jiǎo】拌，以防【fáng】琼脂糊底或溢【yì】出，待【dài】琼脂完全溶解后，再【zài】补充水分至所【suǒ】需量。

5、分装 按实训要求，将配制【zhì】的培养基分【fèn】装【zhuāng】入试【shì】管或【huò】500ml三角瓶内。

6、分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

7、分装量：固体培养基约为【wéi】试管高【gāo】度的1/5，灭菌后制成斜面【miàn】，分装入【rù】三角瓶内以【yǐ】不超过其容积的一半为宜;半【bàn】固体培【péi】养基以试管高【gāo】度的1/3为宜，灭菌【jun1】后垂直待【dài】凝。

8、加棉塞 培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶【píng】口上塞【sāi】上棉塞(或【huò】泡沫塑料【liào】塞或试管【guǎn】帽等【děng】)，以阻止外界微【wēi】生物进入【rù】培【péi】养基【jī】内造成污染，并保证有良【liáng】好的通气性【xìng】能。

9、包扎【zhā】 加塞后，将全部试【shì】管【guǎn】用麻绳或橡皮筋捆好，再在【zài】棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时【shí】冷凝水【shuǐ】润【rùn】湿棉【mián】塞【sāi】，其外再用一【yī】道线绳或橡皮【pí】筋扎好，用记号笔注明培养【yǎng】基名【míng】称、组别、配制【zhì】日期。

10、棉塞制作【zuò】说明棉塞的作【zuò】用：一是防止【zhǐ】杂【zá】菌【jun1】污染【rǎn】;二【èr】是可过滤空气，保【bǎo】证通气良【liáng】好，并可减缓培养基水【shuǐ】分的蒸发，所以正确地制备【bèi】棉【mián】塞是培养基制备中重要的一【yī】环。

11、正确的棉【mián】塞是形状、大小，松紧应【yīng】与【yǔ】试管口(或三角烧瓶)完【wán】全适合。

12、过【guò】紧则【zé】妨碍空气流通，操作不便;过松时，空【kōng】气会毫无障【zhàng】碍地进入试管(或三角烧瓶)中，达【dá】不到【dào】灭【miè】菌的目的。

13、棉塞过小往往易掉进试管内，因此棉塞质量【liàng】的优【yōu】劣对实训的【de】结果【guǒ】有【yǒu】很【hěn】大的影响。

14、正确【què】的棉塞头较大，加塞时，应使棉塞长度【dù】的1/3留【liú】在试管口外【wài】，2/3在【zài】试管口内。

15、目【mù】前【qián】，有条【tiáo】件的实训【xùn】室已使用坚固【gù】的塑料【liào】试管帽【mào】、金属试管帽、硅胶泡沫塞【sāi】替代棉塞，制作棉塞要选纤维【wéi】较【jiào】长的棉【mián】花，一般不选用脱脂棉【mián】。

16、因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵。

17、PDA培养基配制注意【yì】事项【xiàng】培养基经【jīng】灭菌后，必【bì】须放在37C温箱培养24h，无【wú】菌生长者【zhě】方可使用。

18、PDA培养基一般不需要调pH。

19、对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。

20、如【rú】果培养基偏酸或偏碱时，可【kě】用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶【róng】液进行调节。

21、调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防【fáng】止【zhǐ】局部过【guò】酸或过碱破坏培【péi】养基成分【fèn】。

22、培养基在使用时也可以【yǐ】做成不【bú】含琼脂的液体培养基，用【yòng】于菌类的震【zhèn】荡【dàng】培【péi】养。

23、培养基也可以加入【rù】氯霉素或土霉素，加入【rù】量为【wéi】0.2g/L培养基，主要是为【wéi】了【le】抑【yì】制细菌的生长，减少干【gàn】扰【rǎo】性。

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